Клетки-предшественники гранулоцитов и макрофагов
Заслуживает внимания тот факт, что в случае отсутствия роста колоний в культуре при ОМЛ можно повысить эффективность клонирования инкубацией взвеси клеток костного мозга с фитогемагглютинином (ФГА). В результате появляется большое количество колоний, состоящих из лейкозных клеток. Интересно, что фитогемагглютинин не влияет подобным образом на клетки нормального костного мозга, а также на клетки костного мозга при ОМЛ в период ремиссии. Предполагается, что в данном случае ФГА является специфическим стимулятором, действующим только на лейкозные клетки, делая их более чувствительными к КСФ.
При фракционировании в градиенте плотности альбумина клеток костного мозга больных ОМЛ обнаружено, что лейкозные колоние- и кластеробразующие клетки имеют меньшую плотность по сравнению с нормальными.
На основе анализа колониеобразующей способности клеток костного мозга 127 больных с ОМЛ в период обострения была сделана попытка новой классификации лейкозов. Выделены следующие 4 группы:
1. Колониеобразуюший лейкоз. Встречается у 17% больных, ремиссия достигнута у 39% из них. Эта группа гетерогенна по числу и размеру колоний, плотностному распределению КОЕк, соотношению кластеробразующих и колониеобразующих клеток (КлОК/КОЕк). У одних больных этой группы наблюдался дефект в созревании клеток - высокое отношение КлОК/КОЕк - ремиссия у таких больных не была достигнута. У других - число КОЕк было снижено, при нормальном соотношении КлОК/КОЕк, у таких больных, как правило, наступала ремиссия.
2. Лейкоз с образованием больших кластеров (3-40 клеток). Встречается у 24% больных, ремиссия - у 12%. Эта группа имеет наихудший прогноз.
3. Лейкоз с образованием небольших кластеров (3-20 клеток). Встречается у 47%. У 53% больных наблюдалась ремиссия.
4. Лейкоз, при котором колонии не образуются (12% случаев). У этих больных наблюдалось большое количество единичных клеток в культуре. Только у 15% больных была достигнута ремиссия.
Многочисленные данные об изменении колониестимулирующей активности при лейкозах говорят о нарушениях регуляторных механизмов гранулоцитопоэза, которые происходят уже на ранних стадиях болезни. Эти нарушения, в частности, касаются изменения уровня КСФ в сыворотке, моче, снижения или повышения его, отмечающегося при остром и хроническом миелолейкозе. В некоторых же случаях острого лейкоза наблюдается повышение уровня ингибитора гранулоцитопоэза, например, при остром лимфолейкозе. Обнаружено, что злокачественные клетки угнетающе действуют на пролиферацию и дифференцировку нормальных клеток-предшественников. Так, при совместном культивировании клеток нормального костного мозга и периферической крови больных лейкозом ингибирование в образовании колоний наблюдалось при соотношении клеток костного мозга и крови 4: 1 (тогда как нормальные лейкоциты ингибируют гранулоцитопоэз при соотношении клеток костного мозга и крови 1 :4). Такое же ингибирующее действие на КОЕк оказывает и костный мозг больных лейкозом. Предполагается, что лейкозные клетки выделяют факторы, которые угнетают нормальное колониеобразование.
При хроническом миелолейкозе колониеобразующая способность клеток костного мозга и периферической крови значительно превышает норму. У некоторых больных количество циркулирующих в крови КОЕк может увеличиваться в 1000 раз. При ХМЛ образуются гранулоцитарные и макрофагальные колонии с дифференцировкой клеток до зрелых элементов. Хромосомный анализ позволил выявить клональность лейкозных клеток. Оказалось, что все клетки колонии несут характерную для хронического миелолейкоза филадельфийскую хромосому (Ph). Таким образом, при этом заболевании злокачественные клетки образуют колонии, в которых происходят пролиферация и дифференцировка. Обнаружено, что КОЕк при хроническом миелолейкозе отличаются от нормальных колониеобразующих клеток плавучей плотностью.
При наступлении властного криза меняется поведение кроветворных клеток: они приобретают черты, свойственные клеткам острого лейкоза, в частности, теряют способность колониеобразования и формируют вместо колоний кластеры.
При остром и хроническом лимфолейкозе колонии образуются только нормальными клетками-предшественниками. Колониеобразующая способность в обострении у таких больных низкая, тогда как в период ремиссии происходит восстановление числа КОЕк до нормы. В сыворотке таких больных обнаружен ингибирующий фактор.
Изучение колониеобразующей способности клеток-предшественников гранулоцитов и макрофагов у группы людей с повышенным риском заболевания лейкозом позволяет выявить дефекты роста колоний задолго до клинического проявления болезни. Как правило, у таких больных наблюдаются нарушения не только в количестве колоний, но также и в выработке КСФ. Раннее обнаружение дефектов может помочь определить механизмы, действующие in vitro и ведущие к развитию явного лейкоза.
Большой интерес представляют данные, полученные при исследовании клеток костного мозга больных с нейтропенией различного происхождения.
Врожденная нейтропения. При этом заболевании не обнаружено заметных отклонений от нормы ни в колониеобразующей способности, ни в выработке КСФ (при этом часто наблюдается повышенное артериальное давление и гипертония). В результате морфологического исследования исходного костного мозга и клеток колоний в миелоцитах и сегментоядерных нейтрофилах найдены патологические сдвиги в функционально-морфологических структурах клеток. Вероятно, в данном случае причина заболевания кроется в дефекте созревания клеток, проявляющемся в неспособности образовывать вторичные специфические гранулы, а не в нарушении пролиферации клеток-предшественников.
В случаях генетического агранулоцитоза наблюдается почти полная нейтропения с отсутствием зрелых клеток в исходном костном мозге. При использовании в качестве КСФ кондиционированной среды из-под культуры селезенки человека образуется нормальное число колоний с нормальной пролиферацией и дифференцировкой. Сыворотка такого больного не оказывает ингибирующего действия на рост в культуре клеток донорского костного мозга. Таким образом, блокирование созревания гранулоцитов не связано с гуморальным фактором.
При циклической нейтропении в период глубокого обострения болезни число КОЕк в костном мозге нормальное, но клетки плохо реагируют как на собственный, так и на нормальный КСФ. Изучение клеток-предшественников показало, что во время полной нейтропении 50-73% КОЕк находится в S-периоде митотического цикла, а в фазе восстановления число их снижается до 40%. Вполне возможно, что нарушение гранулоцитопоэза у таких больных связано с чувствительностью колониеобразующих клеток к КСФ, что приводит к снижению количества зрелых клеток, а это, в свою очередь, сказывается на выработке КСФ.
Страница 2 - 2 из 2
Начало | Пред. | 1 2 | След. | Конец