Иммунология сенсибилизации и десенсибилизации


Факторы сенсибилизации. Сенсибилизация организма, обусловленная реагинами, происходит в результате контакта с антигеном. В период внутриутробного развития пассивная сенсибилизация исключена, так как реагины не проходят через плаценту. Поэтому при рождении дети, как правило, еще не сенсибилизированы. После рождения ребенка возникает опасность контакта с аллергеном через материнское молоко, ингаляцию и т. д. Возможность сенсибилизации усиливается, если аллерген распространен в данном географическом районе. Подтверждением этого наблюдения служат исследования Grove: положительная реакция была обнаружена у одного из 36 больных поллинозами, которые были тестированы экстрактом аллергена амброзии, служащей основной причиной этого заболевания в США.

Другой фактор сенсибилизации - «агрессивность» аллергена. Это свойство аллергена вызывать преимущественную сенсибилизацию при контакте с несколькими аллергенами. Показателем служит максимальный процент лиц, сенсибилизированных этим аллергеном. В известном смысле «агрессивность» аллергена - это мера его способности вызывать эффект Т-хелперов.

Определенное значение имеют также такие факторы, как продолжительность экспозиции, характер поглощения аллергена, продолжительность и устойчивость сенсибилизации.

Иммунология десенсибилизации. Самые ранние опыты по изучению эффекта десенсибилизации были основаны на предположении, что путем введения в организм аллергена можно вызвать потребление реагинов. Это представление получило известность главным образом после опытов Безредки по антианафилаксии, однако уже в скором времени по этому поводу были высказаны сомнения. Детальные исследования показали, что даже аппликация антигена в дозе, которая может вызвать общую реакцию, не приводит к значительным изменениям уровня реагинов. Было вычислено то количество реагинов, которое содержится в 1 мл сыворотки при явных признаках общей атопической реакции. Представление о том, что антитела связываются антигеном, было признано несостоятельным. Следует считать маловероятной и теорию, согласно которой десенсибилизация - это результат действия неспецифических механизмов, будь то активация системы гипофиза и надпочечников или обычная продукция медиаторов аллергической реакции. Важным аргументом против такого представления служит факт, что успешная десенсибилизация одним аллергеном не влияет на способность реагировать с другими. Тем не менее исследователи вновь обратились к обсуждению этих вопросов. Наблюдения свидетельствуют о том, что десенсибилизация приводит к изменению свойств базофилов и тучных клеток. Это в свою очередь влияет или на процесс связывания IgE, или на результаты биохимических процессов реакции антиген-антитело.

Титр IgE-антител. Десенсибилизация больных атопией вызывает в первые месяцы после лечения 2-4-кратное повышение уровня реагинов. Лишь продолжительная десенсибилизация (в течение 2 лет) может привести к его постепенному снижению. Полностью реагины могут исчезнуть спустя 5-10 лет. Предполагаемые механизмы снижения титров IgE:

- участие блокирующих антител;

- состояние иммунологической толерантности путем активации антигеноспецифических клеток-супрессоров.

Блокирующие антитела. В 1935 г. Cooke и соавт. на основании результатов собственных исследований пришли к заключению, что эффект нейтрализации обеспечивается блокирующими антителами. Их можно обнаружить спустя несколько недель после введения антигена, примерно через 12 месяцев они достигают максимального уровня. Свое название антитела получили в связи с тем, что путем связывания с антигеном они блокируют его реакцию с реагином. С помощью иммуносорбентного метода было показано, что их способность к взаимодействию с аллергеном значительно выше, чем у реагинов. Этим и объясняется их блокирующий эффект. Данные антитела могут вырабатываться у больных, не страдающих атопией. В низких титрах их обнаруживают у нелеченых больных атопией. При лечении (десенсибилизация) уровень антител может повышаться в 20-40 раз. В отдельных случаях были получены положительные результаты переноса гипериммунных сывороток от здоровых лиц больным атопией. Представление о защитных свойствах блокирующих антител не лишено противоречий. Некоторые авторы указывают на повышение концентрации аллергеноспецифических антител IgA и IgG в секретах слизистой оболочки. Воздействие блокирующих антител может проявляться на разных стадиях иммунного ответа:

- афферентная блокада (снижение дальнейшего booster-эффекта) ;

- блокада центрального звена (инактивация IgE-клеток через иммунные комплексы или сходные механизмы);

- эфферентная блокада (конкуренция антител относительно антигена).

Структура антител еще не изучена. Предварительные данные о том, что они относятся к IgG4-субклассу, еще не подтверждены.

Работа De Week продолжила исследования, посвященные эффекту блокирующих антител, В результате повторной сенсибилизации у экспериментальных животных вырабатывались антиидиотипические антитела, которые в соответствии с принципом отрицательной обратной связи блокировали продукцию первичных антител. С помощью пассивного переноса этих антиидиотипических антител у несенсибилизированных животных удалось вызвать состояние толерантности, а у сенсибилизированных - снижение титра антител.

Функция лимфоцитов. Уровень иммунного ответа при антигенной стимуляции может существенно варьировать. Тем не менее следует отметить общие закономерности: тенденцию к нормализации ранее повышенного уровня, а также корреляцию между этим эффектом и дозой антигена.

Как правило, отмечают лишь частичную корреляцию между лабораторными данными и клиническим статусом больного.

Методы доказательства эффекта сенсибилизации. Тесты in vivo.

1. Прямой тест нейтрализации. При этом простом методе проводят инкубацию исследуемой сыворотки, инактивированной нагреванием (инактивация содержащихся реагинов), с разными концентрациями аллергена. Полученную смесь подкожно вводят больному, страдающему повышенной чувствительностью к данному аллергену. В качестве контроля служит аналогичная смесь реагентов с сывороткой здорового человека. Присутствие блокирующих антител проявляется в снижении активности смеси.

2. Аналогичным способом можно сравнить сыворотку, взятую у больного до лечения, с сывороткой, полученной после десенсибилизации. Первую сыворотку сохраняют путем замораживания. Через 3-4 недели после десенсибилизации получают другой образец сыворотки. Равные объемы предварительно прогретых образцов сыворотки инкубируют с целым рядом разведений аллергена, а затем эту смесь используют для проведения внутрикожных проб больным атопией. Если титр блокирующих антител достаточно высок, то смесь аллергена со второй сывороткой вызывает положительные реакции лишь при значительных концентрациях аллергена.

Тесты in vitro:

1. Серологический блокирующий тест. Исследуемую сыворотку нагревают до 56 °С с целью инактивации реагинов. Блокирующее действие сыворотки оценивают в следующей системе: аллерген, связанный с сорбентом и меченная антисыворотка.

2. Биологический блокирующий тест. Используют метод, разработанный Lichtenstein и соавт. Предварительно отмытые лейкоциты больного инкубируют в течение 60 мин при 37 °С с экстрактом аллергена, взятого в разных разведениях. В этот период аллерген взаимодействует с реагинами, связанными на базофилах. С помощью флюорометрии можно регистрировать высвобождающийся в процессе реакции гистамин. Количество свободного гистамина соответствует его общему содержанию в лейкоцитах. Используя разные концентрации антигена, можно определить те разведения, которые приводят к 50% высвобождению гистамина. На основании результатов этого метода можно судить о степени клеточной сенсибилизации. Очевидно, существует комплекс механизмов (специфических и неспецифических), влияющих на процесс клеточного реагирования.

Преимущество этих методов in vitro состоит в том, что при обследовании больных лиц и здоровых доноров можно не проводить кожных проб и апробировать значительное количество тест-аллергенов.

С помощью соответствующих модификаций удалось выделить блокирующие антитела, например, при инкубации аллергена с инактивированной сывороткой и последующим контактом с лейкоцитами больного, реагирующего на данный аллерген. В качестве контроля служит реакция аллергена с сывороткой здорового человека. Титр реагина может быть определен в результате пассивной сенсибилизации лейкоцитов донора и реакции высвобождения гистамина при контакте с аллергеном. Исследования Sadan и соавт. показали, что в результате десенсибилизации, проводимой до наступления сезона, титр реагинов у больных поллинозом значительно превышал таковой у нелеченых пациентов контрольной группы. В то время как у больных контрольной группы при введении определенных доз аллергена наблюдался высокий показатель реакции высвобождения гистамина, у десенсибилизированных лиц он был снижен.

Изменение реактивности клеток-мишеней. При десенсибилизации наряду с изменением титра реагинов и выработкой блокирующих антител может изменяться чувствительность клеток-мишеней. Это впервые предположили Van Arsdel и соавт. на основании опытов по изучению феномена высвобождения гистамина. Используя разные дозы антигена, авторы определяли ту, которая необходима для 50% освобождения гистамина из предварительно отмытых клеток. Дальнейшее увеличение дозы антигена в большинстве случаев приводило к снижению показателя. Эти наблюдения позволили обнаружить еще одну особенность: изменение клеточной реактивности не зависит от титра реагинов. Исследования показали, что основу «неспецифической» десенсибилизации составляют разные механизмы. Их действие может быть непродолжительным (вероятно, как результат дегрануляции) или проявляться более длительное время. Кроме того, было установлено, что клинический эффект не всегда коррелирует с этими изменениями.

Результаты кожной пробы и провокационного теста. Довольно часто при успешной десенсибилизации результаты кожных проб существенно не изменяются. Однако при длительном курсе лечения, как правило, в течение 2- 3 лет, происходит снижение клеточно-опосредованных реакций иммунитета, что подтверждается результатами кожных проб. Эффект выражен в большей степени, если выше доза и продолжительнее период терапии. Что касается провокационного теста, то в большинстве случаев по его результатам оценивают эффект лечения.

Результаты экспериментальных исследований, совершенствование методов десенсибилизации. Результаты опытов на животных способствовали выяснению механизмов IgE-продукции, а также факторов, влияющих на процесс десенсибилизации. Цель последней состоит прежде всего в активации механизмов Т-клеточной супрессии или в торможении иммунного ответа.

Совершенствование методов десенсибилизации представляет важный аспект проблемы клинико-иммунологического обследования пациента. Перед исследователями стоят следующие задачи:

- очистка и стандартизация аллергенов;

- выбор дозы и схемы введения аллергена, использование депо-аллергенов;

- применение модифицированных аллергенов.



Ваше имя:
Защита от автоматических сообщений:
Защита от автоматических сообщений Символы на картинке: