Коревая вакцина
Эта вакцина, применяемая для иммунопрофилактики кори, относится к числу живых вакцин, так как изготовляется на основе аттенуированного штамма вируса кори. Однако перед рассмотрением основных принципов получения и применения этого препарата желательно коснуться ряда вопросов, общих для производства вирусных вакцин вследствие специфики накопления массы вируса в культурах клеток, Преимущественно животного происхождения, либо на тканях развивающихся эмбрионов птиц. Перечисленные субстраты могут быть инфицированы различными контаминирующими агентами, в большинстве случаев потенциально опасными для человека. Это требует организации специальной постоянно проводимой работы по отбору здоровых животных и эмбрионов, а также тщательного контроля получаемого от них материала на отсутствие контаминирующпх агентов: преимущественно различных вирусов животных, микоплазм и т. д. Следует отметить, что подобные агенты поддаются выделению и идентификации далеко не все. Поэтому в настоящее время широко распространено мнение, что в недалеком будущем в качестве универсального субстрата накопления вакцинных вирусов повсеместно будут использоваться культуры диплоидных и подобных им клеток человеческого происхождения, которые свободны от различных вирусов-контаминантов. Их естественными хозяевами являются животные, в частности, используемые для получения клеточных культур, на которых размножаются или, как говорят, репродуцируются вакцинные штаммы. Одной из наиболее изученных и поэтому рекомендуемых ВОЗ клеточных культур является штамм Vi-38 (Вистар), клеточную массу которого достаточно легко можно получить. Она высокочувствительна к большинству вакцинных вирусов и, главное, поддается всестороннему контролю на наличие контаминирующих агентов. Вместе с тем внедрение этой линии клеток в производство вирусных вакцин встречает затруднения не только по причине высокой стоимости необходимого оборудования и существенных изменений традиционно используемой технологии, но и вследствие отсутствия серьезных аргументов в пользу истинной опасности ныне применяемых культур клеток, которые тщательно контролируются на стерильность и онкогенность.
Однако, возвращаясь к основным принципам производства коревой вакцины, следует отметить, что ее изготовление относится к 1954 г., когда американским ученым Дж. Эндерсу и Т. Пиблсу удалось выделить у больного корью ребенка штамм вируса и в последующем его аттенуировать. По имени ребенка этот штамм, получивший название Эдмонстон, стал родоначальником целой группы вакцинных штаммов, используемых в разных странах для производства коревой вакцины. Наряду с этим оригинальные вакцинные штаммы были получены в Японии и СССР. Так, в нашей стране под руководством А. А. Смородинцева в культуре клеток почек морских свинок был получен ряд аттенуированных штаммов Ленинград, из числа которых высоко иммуногенным и в то же время наиболее переносимым по параметрам реактогенности оказался ныне широко используемый в производстве коревой вакцины штамм Л-16. По данным специально проведенных сравнительных исследований, свойства коревой вакцины, изготовленной из этого штамма, были практически идентичны свойствам лучших образцов коревых вакцин, изготовленных из штаммов Эдмонстон и рекомендованных ВОЗ в качестве эталона.
В производственных условиях партия посевного вируса сохраняется в замороженном виде при температуре -20 или -40°С соответственно 6 месяцев или 1 год. Урожай вакцинного вируса получают после его выращивания в культуре клеток 9-10-дневных эмбрионов кур или японских перепелов, которых содержат в специальных, так называемых безлейкозных, хозяйствах. После обработки эмбрионов протеолитическим ферментом трипсином тот или иной объем клеточной суспензии, содержащей по 800 000 клеток в 1 мл, вместе со специальной сложной по составу средой, на которой они культивируются, разливают в матрасы, куда затем вносят по 100 000 тканевых цитопатогенных доз (ТЦД50) вакцинного штамма, после чего посевы инкубируют при 35°С. При этом матрасы постоянно медленно вращаются, совершая 22 оборота в 1 час. Затем надосадочную жидкость, содержащую вирус, отделяют от клеток и их обломков, отсасывают и объединяют в крупные порции вируссодержащего материала, полученного из многих матрасов. Эта вируссодержащая жидкость после добавления стабилизатора является полуфабрикатом. Полуфабрикат сразу разливают в ампулы (флаконы) по 0,1-0,5 мл, где находится от 1 до 5 прививочных доз, каждая из которых содержит не менее чем 100 ТЦД50, или хранят в холодильнике (при 4°С не более 24 ч, а при -40°С в течение 1 года).
После розлива содержимое ампул (флаконов) лиофилизируют и контролируют. Если результаты контроля удовлетворяют существующим требованиям, вакцина применяется для массовой иммунопрофилактики кори.
Срок годности коревой вакцины исчисляется одним годом после выпуска при условии правильной ее транспортировки и хранения на отдельных стеллажах при температуре не выше 4°С, желательно в затемненном сухом месте.
Применяется коревая вакцина в рамках календаря профилактической иммунизации путем однократного подкожного введения одной прививочной дозы с помощью шприца или безыгольного инъектора. В отдельных случаях при наличии эпидемических показаний рекомендуется ревакцинация, преимущественно так называемых серонегативных, т. е. практически неиммунных детей. Перед введением лиофилизированный препарат разводят указанным в инструкции объемомимеющегося в наборе растворителя - стерильного, апирогенного изотонического раствора Хенкса.
Живая коревая вакцина - высокоэффективное средство иммунопрофилактики кори. По данным П. Н. Бургасова, в результате начатого в нашей стране в 1969 г. применения коревой вакцины уже к 1978 г. заболеваемостью корью по сравнению, например, с 1955 г. снизилась более чем в 6 раз. При этом следует учитывать, что использованные в качестве исходных при этом сравнении показатели заболеваемости корью регистрировались на фоне массового проведения столь высокоэффективной меры, как серопрофилактика этой инфекционной болезни. Следовательно, не исключено, что индекс истинной эффективности массового применения коревой вакцины значительно больше приведенного выше.
Однако, возвращаясь к основным принципам производства коревой вакцины, следует отметить, что ее изготовление относится к 1954 г., когда американским ученым Дж. Эндерсу и Т. Пиблсу удалось выделить у больного корью ребенка штамм вируса и в последующем его аттенуировать. По имени ребенка этот штамм, получивший название Эдмонстон, стал родоначальником целой группы вакцинных штаммов, используемых в разных странах для производства коревой вакцины. Наряду с этим оригинальные вакцинные штаммы были получены в Японии и СССР. Так, в нашей стране под руководством А. А. Смородинцева в культуре клеток почек морских свинок был получен ряд аттенуированных штаммов Ленинград, из числа которых высоко иммуногенным и в то же время наиболее переносимым по параметрам реактогенности оказался ныне широко используемый в производстве коревой вакцины штамм Л-16. По данным специально проведенных сравнительных исследований, свойства коревой вакцины, изготовленной из этого штамма, были практически идентичны свойствам лучших образцов коревых вакцин, изготовленных из штаммов Эдмонстон и рекомендованных ВОЗ в качестве эталона.
В производственных условиях партия посевного вируса сохраняется в замороженном виде при температуре -20 или -40°С соответственно 6 месяцев или 1 год. Урожай вакцинного вируса получают после его выращивания в культуре клеток 9-10-дневных эмбрионов кур или японских перепелов, которых содержат в специальных, так называемых безлейкозных, хозяйствах. После обработки эмбрионов протеолитическим ферментом трипсином тот или иной объем клеточной суспензии, содержащей по 800 000 клеток в 1 мл, вместе со специальной сложной по составу средой, на которой они культивируются, разливают в матрасы, куда затем вносят по 100 000 тканевых цитопатогенных доз (ТЦД50) вакцинного штамма, после чего посевы инкубируют при 35°С. При этом матрасы постоянно медленно вращаются, совершая 22 оборота в 1 час. Затем надосадочную жидкость, содержащую вирус, отделяют от клеток и их обломков, отсасывают и объединяют в крупные порции вируссодержащего материала, полученного из многих матрасов. Эта вируссодержащая жидкость после добавления стабилизатора является полуфабрикатом. Полуфабрикат сразу разливают в ампулы (флаконы) по 0,1-0,5 мл, где находится от 1 до 5 прививочных доз, каждая из которых содержит не менее чем 100 ТЦД50, или хранят в холодильнике (при 4°С не более 24 ч, а при -40°С в течение 1 года).
После розлива содержимое ампул (флаконов) лиофилизируют и контролируют. Если результаты контроля удовлетворяют существующим требованиям, вакцина применяется для массовой иммунопрофилактики кори.
Срок годности коревой вакцины исчисляется одним годом после выпуска при условии правильной ее транспортировки и хранения на отдельных стеллажах при температуре не выше 4°С, желательно в затемненном сухом месте.
Применяется коревая вакцина в рамках календаря профилактической иммунизации путем однократного подкожного введения одной прививочной дозы с помощью шприца или безыгольного инъектора. В отдельных случаях при наличии эпидемических показаний рекомендуется ревакцинация, преимущественно так называемых серонегативных, т. е. практически неиммунных детей. Перед введением лиофилизированный препарат разводят указанным в инструкции объемомимеющегося в наборе растворителя - стерильного, апирогенного изотонического раствора Хенкса.
Живая коревая вакцина - высокоэффективное средство иммунопрофилактики кори. По данным П. Н. Бургасова, в результате начатого в нашей стране в 1969 г. применения коревой вакцины уже к 1978 г. заболеваемостью корью по сравнению, например, с 1955 г. снизилась более чем в 6 раз. При этом следует учитывать, что использованные в качестве исходных при этом сравнении показатели заболеваемости корью регистрировались на фоне массового проведения столь высокоэффективной меры, как серопрофилактика этой инфекционной болезни. Следовательно, не исключено, что индекс истинной эффективности массового применения коревой вакцины значительно больше приведенного выше.