Вакцина против сибирской язвы
Эта вакцина относится к группе живых вакцин, так как производится на основе селекционированного Н. Н. Гинсбургом аттенуированного штамма СТИ-1, который в отличие от вирулентных культур возбудителей сибирской язвы утратил протеолитическую активность и способность образовывать капсулу как на питательных средах, так и в организме привитых.
Производственные культуры штамма СТИ-1 хранятся в лиофилизированном состоянии. Перед использованием культуру подготавливают путем посева на агар Хоттингера, который инкубируют в течение 4 сут. Затем микробов смывают с агара раствором глицерина, полученную взвесь спор после проверки на чистоту, отсутствие способности к капсулообразованию, безвредность для кроликов, а также иммуногенность для морских свинок используют в качестве посевного материала, который можно хранить при 4-6°С в течение 6 мес.
В процессе производства вакцины вначале эту взвесь засевают на бульон Хоттингера в бутылях, которые инкубируют в течение 1 суток при 33-34°С, изучают ряд свойств, подлежащих обязательной проверке, и лишь после этого пересевают на матрасы с питательным агаром, которые инкубируют посевом вверх в течение 4 суток при 33-34°С. Затем, удостоверившись в чистоте культуры путем бактериоскопии мазков и наличии 80% спор, из матрасов удаляют внесенный при посеве бульон и конденсат, а затем микробов смывают с поверхности агара 15-20 мл стерильной дистиллированной воды с помощью 10-15 стеклянных бус для гомогенизации суспензии. Смывы с 70 матрасов сливают в бутыли и после подсчета числа спор в единице объема суспензию разводят до содержания 10 млрд. спор в 1 мл, разливают по ампулам и лиофилизируют.
Каждую серию вакцины контролируют на:
- специфическую стерильность (в посевах на разные питательные среды допустим рост микробов только вакцинного штамма; посевы на средах, содержащие 1000 единиц пенициллина в 1 мл вакцины, должны оставаться стерильными; в мазках, окрашенных по Цилю - Нильсену, должны просматриваться только типичные бациллярные и споровые формы);
- физические свойства (таблетка должна полностью растворяться при легком встряхивании с образованием гомогенной взвеси без хлопьев и посторонних включений в течение 2-3 мин; остаточная влажность не должна превышать 5%);
- общее количество и число живых спор (общее число спор при подсчете в камере Горяева с помощью фазово-контрастного микроскопа должно быть не ниже 80% в 1 мл вакцины; из них не менее 90% должны быть жизнеспособными, т. е. прорасти в бациллярные формы на агаре Хоттингера, который микроскопируют через покровное стекло и определяют число не проросших и живых спор после 3-4 ч инкубирования посева при 34-35°С;
- безвредность;
- иммуногенность.
Если результаты контрольных исследований удовлетворяют перечисленным требованиям, серию вакцины применяют для иммунопрофилактики сибирской язвы.
Выпускают вакцину в ампулах, содержащих по 20 человеко-доз.
Вводят вакцину однократно, накожно, методом скарификации или подкожно шприцем, или с помощью безыгольного инъектора.
Разовая прививочная доза при накожной вакцинации составляет 10 млрд. спор, а при подкожном введении - 50 млн. спор, т. е. в 200 раз меньше.
При накожной вакцинации на кожу наносят по две капли вакцины, разведенной стерильным 30% водным раствором глицерина, на расстоянии 3-4 см друг от друга; через каждую каплю делают по 4 параллельные насечки, втирают вакцину плоскостью оспопрививательного пера и дают подсохнуть в течение 5-10 мин. В последующем на месте насечек образуются корочки, которые отпадают на 4-8-й день. При подкожной вакцинации в отдельных случаях в области инъекции может возникнуть инфильтративное уплотнение тканей диаметром до 2,5 см. Достаточно редко у привитых повышается температура до 38°С, отмечаются головная боль, недомогание.
Срок годности живой вакцины против сибирской язвы при условии ее правильной транспортировки и хранения в сухом затемненном месте при температуре не выше 4°С (можно хранить на морозе) 2 года.
Прививки живой вакциной, равно как и последующие ревакцинации через 1 год, показаны лицам старше 14 лет, риск заражения которых сибирской язвой достаточно велик. Это работники предприятий по переработке кожного сырья, шерсти, убойных и разделочных цехов мясокомбинатов и т. п., а также лица, связанные с обслуживанием сельскохозяйственных животных па территориях, стационарно неблагополучных по сибирской язве. Проведенные в последние годы исследования показали несомненную эффективность прививок живой вакциной СТИ.
Производственные культуры штамма СТИ-1 хранятся в лиофилизированном состоянии. Перед использованием культуру подготавливают путем посева на агар Хоттингера, который инкубируют в течение 4 сут. Затем микробов смывают с агара раствором глицерина, полученную взвесь спор после проверки на чистоту, отсутствие способности к капсулообразованию, безвредность для кроликов, а также иммуногенность для морских свинок используют в качестве посевного материала, который можно хранить при 4-6°С в течение 6 мес.
В процессе производства вакцины вначале эту взвесь засевают на бульон Хоттингера в бутылях, которые инкубируют в течение 1 суток при 33-34°С, изучают ряд свойств, подлежащих обязательной проверке, и лишь после этого пересевают на матрасы с питательным агаром, которые инкубируют посевом вверх в течение 4 суток при 33-34°С. Затем, удостоверившись в чистоте культуры путем бактериоскопии мазков и наличии 80% спор, из матрасов удаляют внесенный при посеве бульон и конденсат, а затем микробов смывают с поверхности агара 15-20 мл стерильной дистиллированной воды с помощью 10-15 стеклянных бус для гомогенизации суспензии. Смывы с 70 матрасов сливают в бутыли и после подсчета числа спор в единице объема суспензию разводят до содержания 10 млрд. спор в 1 мл, разливают по ампулам и лиофилизируют.
Каждую серию вакцины контролируют на:
- специфическую стерильность (в посевах на разные питательные среды допустим рост микробов только вакцинного штамма; посевы на средах, содержащие 1000 единиц пенициллина в 1 мл вакцины, должны оставаться стерильными; в мазках, окрашенных по Цилю - Нильсену, должны просматриваться только типичные бациллярные и споровые формы);
- физические свойства (таблетка должна полностью растворяться при легком встряхивании с образованием гомогенной взвеси без хлопьев и посторонних включений в течение 2-3 мин; остаточная влажность не должна превышать 5%);
- общее количество и число живых спор (общее число спор при подсчете в камере Горяева с помощью фазово-контрастного микроскопа должно быть не ниже 80% в 1 мл вакцины; из них не менее 90% должны быть жизнеспособными, т. е. прорасти в бациллярные формы на агаре Хоттингера, который микроскопируют через покровное стекло и определяют число не проросших и живых спор после 3-4 ч инкубирования посева при 34-35°С;
- безвредность;
- иммуногенность.
Если результаты контрольных исследований удовлетворяют перечисленным требованиям, серию вакцины применяют для иммунопрофилактики сибирской язвы.
Выпускают вакцину в ампулах, содержащих по 20 человеко-доз.
Вводят вакцину однократно, накожно, методом скарификации или подкожно шприцем, или с помощью безыгольного инъектора.
Разовая прививочная доза при накожной вакцинации составляет 10 млрд. спор, а при подкожном введении - 50 млн. спор, т. е. в 200 раз меньше.
При накожной вакцинации на кожу наносят по две капли вакцины, разведенной стерильным 30% водным раствором глицерина, на расстоянии 3-4 см друг от друга; через каждую каплю делают по 4 параллельные насечки, втирают вакцину плоскостью оспопрививательного пера и дают подсохнуть в течение 5-10 мин. В последующем на месте насечек образуются корочки, которые отпадают на 4-8-й день. При подкожной вакцинации в отдельных случаях в области инъекции может возникнуть инфильтративное уплотнение тканей диаметром до 2,5 см. Достаточно редко у привитых повышается температура до 38°С, отмечаются головная боль, недомогание.
Срок годности живой вакцины против сибирской язвы при условии ее правильной транспортировки и хранения в сухом затемненном месте при температуре не выше 4°С (можно хранить на морозе) 2 года.
Прививки живой вакциной, равно как и последующие ревакцинации через 1 год, показаны лицам старше 14 лет, риск заражения которых сибирской язвой достаточно велик. Это работники предприятий по переработке кожного сырья, шерсти, убойных и разделочных цехов мясокомбинатов и т. п., а также лица, связанные с обслуживанием сельскохозяйственных животных па территориях, стационарно неблагополучных по сибирской язве. Проведенные в последние годы исследования показали несомненную эффективность прививок живой вакциной СТИ.