Микроскопические методы исследования на гельминтов, нативный мазок
Самым простым методом исследования фекалий на яйца гельминтов был в свое время нативный мазок. Однако многие исследователи, практики здравоохранения указывали на его малую эффективность в выявлении гельминтов разных видов. Этот метод советовали использовать лишь в очагах аскаридоза при высокой интенсивности инвазии.
Для повышения эффективности рекомендовались различные усовершенствования метода мазка или изменения способов его просмотра. Так, Р. Э. Шульц и др. предлагали просматривать до 10 препаратов. Е. С. Шульман рекомендовал метод закручивания: 2-3 г фекалий быстро размешивают с двукратным количеством воды, каплю смеси стеклянной палочкой быстро переносят на предметное стекло. Этот метод особенно ценен для диагностики стронгилоидоза и обнаружения неоплодотворенных яиц аскарид.
В. Н. Дроздов рекомендовал метод закручивания в насыщенном растворе хлорида натрия. При этом препараты имеют более чистое поле зрения и нет необходимости в новом разведении экскрементов для проведения исследований по Фюллеборну.
По И. А. Алексееву-Беркману на широкое предметное стекло наносят 1-2 г испражнений; другим более узким стеклом испражнения раздавливают до получения тонкого равно-. мерного слоя и весь препарат последовательно просматривают при малом увеличении на крестообразном столике. Кацуя Като предложил метод толстого мазка с целлофановой покровной пластинкой и использованием глицерина, 3% малахитового зеленого и 6% раствора фенола. Испытание его в очагах аскаридоза, описторхоза, дифиллоботриоза, трихоцефалеза и для диагностики тениаринхоза показало его преимущество и удобство. При обследованиях мазки могут быть приготовлены на месте и доставлены в лабораторию. Они долго сохраняются, а потому могут быть собраны в большом количестве и в последующем просмотрены в лаборатории в течение нескольких дней. Этот метод рекомендован для широкого использования его в практике. Не советуют его применять в очагах гименолепидоза и анкилостомидозов: по методу Като выявляется в 4 раза меньше яиц карликового цепня, чем по методу обогащения, отмечается деформация яиц карликового цепня и анкилостомид. В связи с этим метод Като применяют обязательно в сочетании с методом обогащения.
Ю. А. Березанцев, Е. Г. Автушенко впервые применили стереоскопический бинокулярный микроскоп, который позволяет с малой затратой времени исследовать нативные мазки (с 5-6 каплями 50% раствора глицерина) на стекле размером 6X9 см, при этом используется 200-300 мгфекалий (вместо 30-50 мг исследуемых на предметном стекле под биологическим микроскопом).
Методы обогащения, основанные на принципе осаждения яиц (по Тельману). При использовании этих методов, кроме элементов просеивания и центрифугирования, вводят растворитель (смесь эфира и крепкой соляной кислоты) по Р. Э. С. Шульцу. Рубашев предложил заменить эфир более дешевым бензином.
Методы обогащения, основанные на принципе всплывания яиц. Басе впервые предложил метод всплывания с насыщенным раствором хлорида натрия или калия. В России этот метод впервые был применен Э. Д. Гинзбургом в 1911 г. В 1918 г. Кофоид и Барбер предложили более простой метод: 1 часть кала смешивают с 2 частями насыщенного раствора хлорида натрия, поднявшиеся на поверхность яйца снимают проволочной петлей. В 1920 г. Фюллеборн предложил разводить испражнения насыщенным раствором хлорида натрия в пропорции 1:20.
Е. В. Калантарян заменила насыщенный раствор хлорида натрия насыщенным раствором нитрата натрия, с большой относительной плотностью (1,38), что повысило эффективность метода, значительно сократило время исследования (пленку можно снимать уже через 20 мин), ликвидировало необходимость исследовать осадок.
А. Н. Брудастов и Л. Н. Краснонос рекомендовали в качестве флотационной жидкости использовать смесь 900 г натриевой селитры и 400 г калиевой селитры, растворенных при подогревании в 1 л воды. Такой раствор имеет повышенную плотность (1,47).
По наблюдениям Ю. А. Березанцева, Е. Г. Автушенко лучшими жидкостями для флотационного метода являются насыщенные растворы аммиачной (относительная плотность 1,30) и натриевой селитры (относительная плотность 1,38). Для получения аммиачной селитры с относительной плотностью 1,30. В. А. Лугин предложил 3 кг аммиачной селитры растворять в 2 л водопроводной воды, нагревать раствор до кипения и после отстаивания фильтровать через вату.
Для упрощения методики рекомендованы изготовленные из органического стекла 10-гнездные кассеты, осуществление методов всплывания непосредственно на предметном стекле. По наблюдениям Ю. А. Березанцева, Е. Г. Автушенко наибольшее число яиц всплывало в стаканчике вместимостью 50 мл.
Для увеличения концентрации яиц гельминтов в солевом растворе Е. Н. Симонович, В. Е. Гружевский и М. Н. Соколова предложили использовать смесь зеленого мыла с этиловым спиртом в равных объемах, что дает возможность, помимо концентрации и удержания всех всплывших яиц на одном небольшом участке солевого раствора, заметить момент полного извлечения яиц.
Для повышения эффективности рекомендовались различные усовершенствования метода мазка или изменения способов его просмотра. Так, Р. Э. Шульц и др. предлагали просматривать до 10 препаратов. Е. С. Шульман рекомендовал метод закручивания: 2-3 г фекалий быстро размешивают с двукратным количеством воды, каплю смеси стеклянной палочкой быстро переносят на предметное стекло. Этот метод особенно ценен для диагностики стронгилоидоза и обнаружения неоплодотворенных яиц аскарид.
В. Н. Дроздов рекомендовал метод закручивания в насыщенном растворе хлорида натрия. При этом препараты имеют более чистое поле зрения и нет необходимости в новом разведении экскрементов для проведения исследований по Фюллеборну.
По И. А. Алексееву-Беркману на широкое предметное стекло наносят 1-2 г испражнений; другим более узким стеклом испражнения раздавливают до получения тонкого равно-. мерного слоя и весь препарат последовательно просматривают при малом увеличении на крестообразном столике. Кацуя Като предложил метод толстого мазка с целлофановой покровной пластинкой и использованием глицерина, 3% малахитового зеленого и 6% раствора фенола. Испытание его в очагах аскаридоза, описторхоза, дифиллоботриоза, трихоцефалеза и для диагностики тениаринхоза показало его преимущество и удобство. При обследованиях мазки могут быть приготовлены на месте и доставлены в лабораторию. Они долго сохраняются, а потому могут быть собраны в большом количестве и в последующем просмотрены в лаборатории в течение нескольких дней. Этот метод рекомендован для широкого использования его в практике. Не советуют его применять в очагах гименолепидоза и анкилостомидозов: по методу Като выявляется в 4 раза меньше яиц карликового цепня, чем по методу обогащения, отмечается деформация яиц карликового цепня и анкилостомид. В связи с этим метод Като применяют обязательно в сочетании с методом обогащения.
Ю. А. Березанцев, Е. Г. Автушенко впервые применили стереоскопический бинокулярный микроскоп, который позволяет с малой затратой времени исследовать нативные мазки (с 5-6 каплями 50% раствора глицерина) на стекле размером 6X9 см, при этом используется 200-300 мгфекалий (вместо 30-50 мг исследуемых на предметном стекле под биологическим микроскопом).
Методы обогащения, основанные на принципе осаждения яиц (по Тельману). При использовании этих методов, кроме элементов просеивания и центрифугирования, вводят растворитель (смесь эфира и крепкой соляной кислоты) по Р. Э. С. Шульцу. Рубашев предложил заменить эфир более дешевым бензином.
Методы обогащения, основанные на принципе всплывания яиц. Басе впервые предложил метод всплывания с насыщенным раствором хлорида натрия или калия. В России этот метод впервые был применен Э. Д. Гинзбургом в 1911 г. В 1918 г. Кофоид и Барбер предложили более простой метод: 1 часть кала смешивают с 2 частями насыщенного раствора хлорида натрия, поднявшиеся на поверхность яйца снимают проволочной петлей. В 1920 г. Фюллеборн предложил разводить испражнения насыщенным раствором хлорида натрия в пропорции 1:20.
Е. В. Калантарян заменила насыщенный раствор хлорида натрия насыщенным раствором нитрата натрия, с большой относительной плотностью (1,38), что повысило эффективность метода, значительно сократило время исследования (пленку можно снимать уже через 20 мин), ликвидировало необходимость исследовать осадок.
А. Н. Брудастов и Л. Н. Краснонос рекомендовали в качестве флотационной жидкости использовать смесь 900 г натриевой селитры и 400 г калиевой селитры, растворенных при подогревании в 1 л воды. Такой раствор имеет повышенную плотность (1,47).
По наблюдениям Ю. А. Березанцева, Е. Г. Автушенко лучшими жидкостями для флотационного метода являются насыщенные растворы аммиачной (относительная плотность 1,30) и натриевой селитры (относительная плотность 1,38). Для получения аммиачной селитры с относительной плотностью 1,30. В. А. Лугин предложил 3 кг аммиачной селитры растворять в 2 л водопроводной воды, нагревать раствор до кипения и после отстаивания фильтровать через вату.
Для упрощения методики рекомендованы изготовленные из органического стекла 10-гнездные кассеты, осуществление методов всплывания непосредственно на предметном стекле. По наблюдениям Ю. А. Березанцева, Е. Г. Автушенко наибольшее число яиц всплывало в стаканчике вместимостью 50 мл.
Для увеличения концентрации яиц гельминтов в солевом растворе Е. Н. Симонович, В. Е. Гружевский и М. Н. Соколова предложили использовать смесь зеленого мыла с этиловым спиртом в равных объемах, что дает возможность, помимо концентрации и удержания всех всплывших яиц на одном небольшом участке солевого раствора, заметить момент полного извлечения яиц.